便携式三聚氰胺检测仪

蒸馏水或去离子水..
可吸取50ul的移液器及吸头.
可吸取50ul和100ul的八道移液器及吸头.
吸水纸或相当的吸水材料.
450nm的酶标仪.
计时器.
洗瓶
混旋器.
20mM PBS： 0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl ,蒸馏水定容至1000ml.
注意事项
最好配套使用试剂，不要同其它公司的产品混用，不要将不同批次的产品混用。
样品稀释或含有杂质很可能对结果的准确性有影响。
不要使用过期的产品。
使用之前将所有试剂回升至室温，但不要放置超过24小时。
三聚氰胺属于有毒性的化学品，请小心处理。
停止液是1N盐酸，避免接触皮肤。 
样品制备（以美国Beacon试剂为例）
湿的宠物食品萃取方法（稀释倍数：100）
均质样品至布丁状。
称取2g样品加入10mL 60%甲醇/水溶液，并剧烈振荡。
超声萃取1分钟。
漩涡混合1分钟，然后静置5分钟，使样品分层。
3000 g 室温离心5分钟。
用玻璃纤维滤纸过滤上清液，并将萃取液收集于一干净试管中。
用样品稀释液将滤液20倍稀释（如：0.1mL滤液+1.9mL 10%甲醇/20mMPBS）
移取150 ul 进行分析。
注意：用此方法测定了8个添加有15ppm三聚氰胺的猫粮（非要求召回），回收率范围为75%-117%。
本方法只可作为样品筛选方法，不可作为最终确认方法。
小麦面筋蛋白萃取方法：（稀释倍数：500）
1.均质或混匀小麦面筋蛋白样品。
2.称取0.2g均质好的样品加入10mL 酸化的60%甲醇/水溶液(1mL 1N HCl/ 100mL 60%甲醇/水)。
3.漩涡混合并超声萃取，使样品溶解（确保样品中没有结块）。
4.用样品稀释液稀释萃取液按照1:10比例。（0.5mL+4.5mL 10%MeOH/20 mM PBS）。
5.10000转/分离心上清液10分钟。
6.用G6玻璃纤维滤纸过滤上清液，并将萃取液收集于一干净试管中。
7.移取150 ul 进行分析。
注意：如果样品中含有大量的添加物，需要加入更大量的萃取溶液，以保证萃取效率。
操作人依据自己的判断力，如果测试结果比较高，需要加入两倍的萃取溶液（0.2/20mL），进行二次测定。
干的宠物食品萃取方法（稀释倍数：200）
1.质器均质干的宠物饲料样品。
2.称取1g样品加入10mL 60%甲醇/水溶液，并剧烈振荡。
3.超声萃取1分钟。漩涡混合1分钟，然后静置5分钟，使样品分层。
4.3000 g 室温离心5分钟。
5.用G6玻璃纤维滤纸过滤上清液，并将萃取液收集于一干净试管中。
6.用样品稀释液将滤液20倍稀释（如：0.1mL滤液+1.9mL 10%甲醇/20mMPBS）
7.移取150 ul 进行分析。

免疫测定过程 (注意: 标准及样品最好做平行试验以增加准确度)
将所有试剂及样品回升至室温20-280C，但不要放置超过24小时。
从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮
吸取150ul标准、样品到对应微孔中，必须保证每种溶液使用干净的吸头吸取，避免交叉污染。加入50ul三聚氰胺酶标记溶液到每个小孔中。
混合60秒，20-28摄氏度下孵育30分钟。
将微孔中的溶液倒入水槽中，用蒸馏水完全充满微孔，震荡后倒掉，重复三次，总共四次洗板。
在吸水纸上拍打，尽可能将水拍干。
每个微孔中加入100ul底物溶液。
20-28摄氏度下，孵育30分钟。
每个微孔中加入100ul停止液。
450nm下读板。
结果分析
MB100便携式三聚氰胺检测仪，半定量的结果是由样品的吸光率与标准的吸光率的简单对比而来判定:样品的颜色比标准的颜色浅则三聚氰胺的浓度比标准样的浓度高, 样品的颜色比标准的颜色深则三聚氰胺的浓度比标准样的浓度低。
定量分析需要绘制以标准样的吸光率为X轴,以标准样的浓度的半对数为Y轴的曲线图.依据标准样吸光率的点画成一直线,如此样品的光吸收率可在线上找到,与此相对应的Y轴则为样品的浓度,样品光吸收率范围应比标准样的最底范围高,比最高范围低, 即可说明此样品中三聚氰胺的含量大于500ppb或小于20ppb。

 MB100便携式三聚氰胺检测仪操作步骤：

 

试剂盒大同小异；

１．将样品用甲醇或水提取，离心
２．将试剂盒梅标板室温下回温至少一个小时
３．提取液＼标准１５０微升，移入酶标板井
４．加入ＨＲＰ５０微升
５．震动，反应３０分钟
６．倒掉反应液，用清洗液冲洗４次，吸水纸吸水
７．加入色原底物１００微升，放置３０分钟
８．加入终止液１００微升，
９．１５分钟后４５０ｎｍ下比色
１０．根据标准曲线，计算三聚氰胺的浓度

试剂盒，酶标仪４５０ｎｍ，１０００微升＼２００微升、５０微升移液枪和八道移液枪，吸水纸，枪头等。

注意移液时间和避免交叉污染。每次要有标准曲线。